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化學發光免疫分析法根據其标記物的不同可分爲三大類，即直接化學發光免疫分析、化學發光酶免疫分析和電化學發光免疫分析法。

1. 直接化學發光免疫分析

通常由吖啶酯直接标記抗體(抗原)，與待測标本中相(xiàng)應的抗原(抗體)發生免疫反應後，形成固相(xiàng)包被抗體待測抗原吖啶酯标記抗體複合物，這時隻需加入氧化劑( H²O² )和NaOH使成堿性環境，吖啶酯便可分解、發光。

2. 化學發光酶免疫分析

從标記免疫分析角度，化學發光酶免疫分析( CLEIA )，應屬酶免疫分析，隻是(shì)酶反應的底物是(shì)發光劑，操作步驟與酶免分析完全相(xiàng)同: 以酶标記生物活性物質(如酶标記的抗原或抗體) 進行免疫反應，免疫反應複合物上的酶再作用于發光底物，在信号試劑作用下發光，用發光信号測定儀進行發光測定。目前常用的标記酶爲辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(ALP)，它們有各自的發光底物。

（1）辣根過氧化酶--魯米諾( HRP-Luminol )系統

常用的底物爲魯米諾，或其衍生物如異魯米諾。先用辣根過氧化物酶( HRP )标記抗體(或抗原)，在與反應體系中的待測标本和固相(xiàng)載體發生免疫反應後，形成固相(xiàng)包被抗體待測抗原-酶( HRP )标記抗體複合物，再加入魯米諾發光劑、H20，和化學發光增強劑使産生化學發光。

（2）堿性磷酸酶--AMPPD ( ALP-AMPPD )系統

通常以AMPPD作爲堿性磷酸酶( ALP )的化學發光底物，屬于輝光型發光，波長爲470 nm。在适宜的緩沖液中，随着酶的催化水解作用，AMPPD分解成AMP-D，後者發出強度很高的光信号，其發光的速度取決于堿磷酶的濃度。

3. 電化學發光免疫分析

電化學發光免疫分析( ECLIA )是(shì)以電化學發光劑三聯吡啶钌标記抗體(抗原)，以三丙胺(TPA)爲電子供體在電場中因電子轉移而發生特異性化學發光反應它包括電化學和化學發光兩個過程。